CCALTA HANCCO, Ruth; ORDONEZ-RODRIGUEZ, Cesar Domingo; CCALTA HANCCO, Ada Luz    CUCHO DOLMOS, Hernán Carlos. Ciclodextrina cargada con colesterol en la criopreservación de semen de alpaca (Vicugna pacos) Una alternativa metodológica. []. , 9, 2, pp.39-48.   01--2022. ISSN 2311-3766.  https://doi.org/10.36610/j.jsaas.2022.090200039.

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El objetivo del estudio fue evaluar efecto de tres niveles (0, 1.5 y 3 mg) de colesterol cargado con metil-β-ciclodextrina (MCD) en la criopreservación de semen de alpaca. Se utilizaron seis alpacas machos de la raza Huacaya de 6 a 8 años, tres para la colección de semen por el método de poscópula (PC), y de tres se recuperaron los espermatozoides (EPZ) por desviación de los conductos deferentes (DCD), se hicieron 3 colectas por animal. Se evaluó el volumen, filancia, movilidad total, concentración, EPZ vivos, integridad de la membrana espermática e integridad acrosomal. Se empleó un sistema de análisis computarizado (ISAS®) en las evaluaciones microscópicas. Las muestras fueron diluidas con base Tris hasta una concentración de 15 millones de EPZ por mL a las muestras de PC se añadió papaína, después inhibidor de papaína. Se añadió MCD en ambos métodos, se evaluó los parámetros microscópicos en refrigerado y descongelado, proceso en el que se usó dimetilformamida como crioprotector. Las variables macroscópicas se evaluaron mediante la estadística descriptiva, las variables microscópicas (movilidad, EPZ vivos, funcionalidad de la membrana e integridad acrosomal) con un arreglo factorial en un diseño al azar. Para todas variables microscópicas en estudio se hallaron diferencias significativas (P< 0.05) entre la etapa de refrigerado en relación al descongelado en ambos métodos. Para el método de PC, no se ha observado diferencias significativas (P> 0.05) para la movilidad y vitalidad entre tratamientos. Sin embargo, EPZ tratados con 1.5 mg de MCD presentaron mayor (P< 0.05) funcionalidad de la membrana e integridad de acrosoma. En los espermas provenientes de la DCD, no se hallaron diferencias significativas (P> 0.05) entre tratamientos para la movilidad y la funcionalidad de la membrana, pero hubo diferencia significativa (P< 0.05) para la vitalidad e integridad acrosomal cuando se adicionó 1.5 mg de MCD en relación a 3 mg MCD. En conclusión, los EPZ tratados con 1.5 mg de MCD tienen mejores características microscópicas en al refrigerado y descongelado en ambos métodos.

The objective of the study was to evaluate the effect of three levels (0, 1.5 and 3 mg) of cholesterol loaded with methyl-β-cyclodextrin (MCD) in the cryopreservation of alpaca semen. Six male alpacas of the Huacaya breed from 6 to 8 years old were used, three for the collection of semen by the vaginal aspiration method (PC), and from three the EPZ were recovered by deviation of the vas deferens (DCD), three collections were madeper animal. Volume, filance, total motility, concentration, EPZ live, sperm membrane integrity and acrosomal integrity were evaluated. A Computer-assisted semen analysis (ISAS®) was used in the microscopic evaluations. The samples were diluted with Tris base to a concentration of 15 million EPZ per mL. It was added papain to samples collected by PC, followed by papain inhibitor. MCD was added in both methods, the cooled and thawed microscopic parameters were evaluated, a process in which dimethylformamide was used as a cryoprotectant. Macroscopic variables were evaluated using descriptive statistics, microscopic variables (mobility, live sperm, membrane functionality, and acrosomal integrity) were analyzed with a factorial arrangement in a randomized design. For all microscopic variables, significant differences (P<0.05) were found between the cooled stage in relation to thawing in both methods. For the PC method, no significant differences (P> 0.05) were found for mobility and vitality between treatments. However, EPZ treated with 1.5 mg of MCD presented higher (P<0.05) membrane functionality and acrosome integrity. In sperm from DCD, no significant differences (P> 0.05) were found between treatments for membrane mobility and functionality, but there was a significant difference (P< 0.05) for vitality and acrosomal integrity when 1.5 mg MCD relative to 3 mg MCD. In conclusion, the EPZ treated with 1.5 mg of MCD have better microscopic characteristics in cooled and thawed semen.

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