Abstract

CONDO MONTERO, CLAUDIA; SALAMANCA CAPUSIRI, EFRAÍN; FLORES, NINOSKA  and  GIMENEZ TURBA, ALBERTO. Estandarizacion de un metodo fluorometrico sobre trofozoitos de giardia lamblia. Rev.Cs.Farm. y Bioq [online]. 2015, vol.3, n.1, pp.37-45. ISSN 2310-0265.

Giardia lamblia es un protozoo intestinal que causa procesos diarreicos de gran impacto epidemiológico en nuestro país, especialmente en niños. Las drogas utilizadas para el tratamiento son eficientes pero muchas producen efectos secundarios, debido a ello existen búsquedas de nuevos agentes antiparasitarios naturales y sintéticos por lo que existe la necesidad de contar con un método de evaluación antiparasitario in vitro sensible, cualitativo y rápido. En el presente estudio se estandarizo in vitro una técnica fluorometrica con el indicador resazurina, el mismo que tiene como base los cambios de oxido-reducción del compuesto resazurina (no fluorescente) a resorufina (fluorescente) debido a la reducción química de las oxidoreductasas presentes en las células viables. Así para la estandarización del método fluorometrico se trabajo con una longitud de excitación y emisión de 540 - 590nm respectivamente, determinando la población parasitaria de trabajo en un rango de 2,5x105 a 1,5 x106 trofozoitos /mL, el tiempo óptimo de incubación se midio a las 2, 3, 4, 5, 6 y 7 horas y la concentración de re-sazurina de 4mM, 2mM, 1mM, 0.5mM y 0.25mM. Una vez obtenidos los datos se determino de manera in vitro la IC50 de varios antiparasitarios convencionales para el tratamiento de Giardia, trabajando con 7,5x105 trofozoitos /mL, tiempo de incubación 4 horas y concentración de aceptor de electrones 2mM, así mismo se trabajo con Alcaloides Totales de Corteza de la Evanta (Galipea longiflora) a una concentración de 100 ug/mL. Obteniendo la IC50 de albendazol (0.4 uM), metronidazol (2.1 uM), tinidazol (1.5uM), mebendazol (0.81 uM) y CAT (77 ug/mL). Logrando estandarizar finalmente un método fluorometrico, sensible y cuantitativo para las evaluaciones anti parasitarias dentro del 1.1.EB.

Keywords : dia lamblia; Susceptibilidad; ometrico; Resazurina; centracion Inhibitoria media .

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