Introducción
Un potencial que tiene Perú, es el sector ovino, cuenta con un gran número de animales, lamentablemente se tiene una tasa negativa de crecimiento (-3.5 %) y por ende una disminución en su producción (-1.17 %)1 por lo tanto es necesario establecer mejoras en los índices productivos y reproductivos a través de programas de mejoramiento ganadero para el incremento de la producción de hatos, de ahí se viene promoviendo la difusión de semen de alto valor genético en la especie ovina, para ello la inseminación artificial (IA) es una biotecnología reproductiva apropiada para cumplir con esta meta2.
Los métodos de sincronización de celo (SC) son una herramienta de mucha utilidad en los programas de IA2, se han desarrollado varias técnicas de SC para inducir estro en ovinos3. Los tratamientos con progestágenos a largo plazo (12 a 14 días) se aplican comúnmente en ovinos4-13, con un porcentaje de animales que presentan celo y tasas de fertilidad aceptables12, pero con una fertilidad menor al celo natural14-16. Esta tasa baja de fertilidad se da por diferentes causas como, deficiencias en la detección y SC, recambio folicular lento que genera un folículo persistente 4,17,18 por otro lado el sistema tradicional de sincronización trae consigo infecciones vaginales15,19, con proliferación bacteriana20 también se ha asociado con acumulo de moco vaginal ofensivo, mal olor21, adherencias vaginales, vaginitis22, que se traducen en bajas tasas de fertilidad, tras la IA con semen fresco.
Se ha informado que los protocolos cortos (5 a 7 días) con dispositivos progestágenos4,23, son tan efectivas como los protocolos tradicionales (12-14 días)24.
Martinez-Ros et al.5, Amer & Hazzaa6, Ungerfeld & Rubianes7, Knights et al.3, mencionan que el tratamiento corto de sincronización tiene una fertilidad similar al tradicional de SC, mientras que Almadaly et al.25, Viñoles et al.4, Farfán et al.9 Özyurtlu et al.14 Vilariño et al.13 Sareminejad et al.26 reportan resultados de fertilidad mayores al tratamiento tradicional de sincronización, es por ello que protocolos de sincronización corta (5 a 7 días) podrían ser una alternativa al uso tradicional de sincronización largo, esto ayudaría a ser más flexible en campo y así evitar los problemas descritos anteriormente.
Frente a esta disyuntiva se pretende evaluar el protocolo corto y largo de SC en borregas inseminadas con semen congelado para determinar que protocolo es más eficiente en el diámetro uterino y la tasa de preñez.
Materiales y métodos
Lugar y animales del experimento. El experimento se realizó en el Centro de Experimental “Carolina”, perteneciente a la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Nacional del Altiplano, ubicado en el Distrito de Puno y Provincia de Puno-Perú, alrededor de las coordenadas 15º 52` 11`` de Latitud Sur y 70º 24` 32`` de Longitud Oeste, a una altitud de 3995 m.s.n.m. Se utilizó un total de 40 ovinos (20 ovejas adultas Corriedale y 20 ovejas adultas Criollas) (Tabla 1), multíparas tomadas al azar del rebaño de borregas, con una condición corporal de 2.5 (escala de 1 a 5) que fueron ecografiadas para descartar preñez, clínicamente sanas, con un sistema de crianza extensivo, mantenidas antes y durante el experimento en condiciones de pastoreo en praderas naturales sin suplementación. El experimento se realizó entre los meses de abril y mayo.
Ovinos Corriedale | Ovinos Criollos | |||
---|---|---|---|---|
20 | 20 | |||
*TL P4 | **TC P4 | *TL P4 | **TC P4 | |
10 | 10 | 10 | 10 |
*TL P4: Tratamiento Largo con progesterona.
** TC P4: Tratamiento Corto con progesterona
Sincronización de celo . A las borregas se les colocó esponjas intravaginales impregnadas con 60 mg. de acetato de medroxiprogesterona (MAP, Progespon®, Syntex S.A., Argentina)27 un día aleatorio del ciclo estral (Día 0), por un total de 5 días para el protocolo corto de progesterona5,28 y de 9 días para el protocolo largo de progesterona17,29. El día 5 y 9 de los tratamientos, se retiró las esponjas de P4 y se aplicó 350 UI de gonadotropina coriónica equina (eCG, Novormon®, Syntex S.A., Argentina) vía intramuscular a cada borrega7,15.
Evaluación ultrasonográfica e inseminación artificial. Los exámenes ultrasonográficos para la medición del diámetro del cuerno uterino (DCU) se realizó a las 36 h de post aplicación de eCG y el diagnóstico de gestación a los 35 días post IA, en ambos casos se usó un ecógrafo en modo B en tiempo real (Esoate Pie Medical®, Tringa Linear VET). Las borregas fueron inseminadas a las 56 h post aplicación de eCG, se utilizó semen congelado en pajillas de 0.25 mL, que tenían una concentración espermática de 300 x 106 previa descongelación a 35 °C por 30 s. Se hizo una evaluación subjetiva de la motilidad seminal que resultó ser el 45 % en promedio8, debido a que pertenecían a un mismo reproductor.
Análisis estadístico. Los datos fueron sometidos a estadística descriptiva (media, desviación estándar y coeficiente de variabilidad), al comparar dos grupos (tratamiento corto y largo) y evaluando su normalidad y homocedasticidad los DCU fueron sometidos a una Prueba de “t”, mientras que la tasa de preñez obtenida en proporciones fue sometida a la prueba no paramétrica de chi cuadrado ambas pruebas evaluadas con una confiabilidad del 95 %, todos los datos fueron evaluados en el programa estadístico R 3.4.1. con su extensión de RCmdr (R Core Team, 2020)
Resultados
En la Tabla 2 se describe los estadísticos para el DCU en borregas Corriedale y Criollas sincronizadas con el protocolo de sincronización corto y largo, observando medias similares tanto en relación al tipo de protocolo y raza (p=0.1206 y 0.6197 respectivamente) lo que indica que el periodo de sincronización no influye en la variación del DCU ni tampoco la raza de borregas. Se tuvo un total de 5 esponjas perdidas (4 para el protocolo largo y 1 para el protocolo corto).
Factores | Niveles | No | Prom±D.S (mm) | CV (%) | Sign. |
---|---|---|---|---|---|
Periodo de sincronización | Corto | 19 | 11.11±1.52 | 13.68 | 0.1206 |
Largo | 16 | 12.12±2.12 | 17.49 | ||
Raza de borregas | Corriedale | 19 | 11.11±1.63 | 14.36 | 0.6197 |
Criollo | 16 | 11.87±2.17 | 19.08 |
La Tabla 3 muestra la tasa de preñez en borregas según periodo de sincronización y raza, la proporción de borregas preñadas sincronizadas por 5 días fue de 21.05 % y en borregas sincronizadas por 9 días fue de 25 % (p=0.7817), en tal sentido no habría dependencia alguna entre el periodo de duración del protocolo de sincronización de celo (corto y largo) en relación a la mayor o menor tasa de preñez.
Discusión
Los resultados señalan la presencia de DCU significativo en ambos tratamientos, puede deberse a la aplicación de eCG que reduce la atresia de folículos preovulatorios, por lo que se genera un incremento de la concentración de estrógenos manifestando estro y ovulación en las borregas6,30-32 puesto que aplicamos una dosis de 350 UI que influenció en la concentración de estrógenos. Sin embargo, se observa una ligera diferencia entre el DCU siendo ligeramente superior el tratamiento largo en relación al corto, esta característica pudo ser medida debido a que la pared uterina tiene una ecotextura más heterogénea (por el aumento de vascularización y el edema de los cuernos) que en el diestro y durante el celo, normalmente es posible diferenciar los pliegues endometriales y el miometrio, así como las pequeñas acumulaciones de líquido en la luz del útero33, esta diferencia es debida a que durante el tratamiento largo se podría observar un mayor crecimiento folicular4, que se caracteriza por una mayor producción de estrógenos que conlleva a un ligero aumento del diámetro uterino debido al incremento del desarrollo endometrial y de glándulas endometriales, además de edema por mayor vascularización en comparación al tratamiento corto3,6,9. Además Teixeira de Sousa et al.34 señalaron en novillas hay un incremento del DCU por efecto del estrógeno favoreciendo la preñes.
La comparación de DCU en relación a la raza no hay diferencia estadística siendo para ovinos Criollos (11.87±2.17 mm) en comparación a ovinos Corriedale (11.35±1.63 mm) lo que indicaría que las ovejas Criollas y Corriedale tuvieron respuestas parecidas a los protocolos de sincronización del presente estudio por lo que los estrógenos influenciaron en el diámetro uterino a pesar que existan factores genéticos o raciales30 que podrían influenciar puesto que la raza Criolla es más prolífica que la Corriedale, lo que probablemente causó mayor sensibilidad al protocolo de sincronización y por ende un mayor DCU. Los estudios de DCU por efecto del protocolo de sincronización son escasos, por lo que este estudio podría poner la base para posteriores estudios respecto al tema, además ayudaría a identificar parámetros indicativos que sean útiles para el descarte de ovinos o como un indicador de presencia de estrógeno.
Respecto a la tasa de gestación (Tabla 3) son semejante con lo mencionado por Gibbons & Cueto10 y Muñoz et al.11 para IA con semen congelado vía cervical con una sola inseminación mientras que Perez et al.8 tuvo una gestación de 68 % por su doble inseminación con semen descongelado11 Igualmente coinciden con Knights et al.3, Ungerfeld & Rubianes7 y Martinez-Ros et al.5, al reportar tasas de gestación ligeramente mayores para protocolos largos (12 días) respecto a cortos (5 días), mientras que Koyuncu et al.24, Da Silva et al.12 y Amer & Hazzaa6 tuvieron tasas de gestación mucho mayores para el protocolo largo (14 o 12 días) respecto al corto ( 6 o 7 días), pero no concuerdan con Vilariño et al.13, Farfán et al.9 de Özyurtlu et al.14, Sareminejad et al.26 ni con Verdoljak et al.23 quienes reportaron una tasa de preñez mayor para protocolo corto (6 o 7 días) respecto al protocolo largo (14 o 12 días). Nuestros resultados de gestación para el tratamiento corto de 21.05 % y para el tratamiento largo de 25 % fueron bajos en comparación con los demás autores debido a varios factores como al uso de monta natural3,5-7,12,24, alimentación balanceada6,12, aplicación de cloprostenol12, aplicación eCG a dosis más altas3,5,7,12, efecto macho12 diferencia entre razas, mientras que en nuestro trabajo se usó semen descongelado y se sabe que la congelación de semen disminuyendo la tasa de gestación35,36 a esto se adiciona la carencia nutricional propia de la época de año6. La diferencia en nuestros resultados por efecto del tipo de protocolo podría deberse a que se aplicó eCG (350 UI) al final de los dos tratamientos por lo que pudo ocasionar formación de quistes foliculares en el tratamiento corto4, mientras que en el protocolo largo podría haber contrarrestado los problemas de fertilidad4,17,37,38.
Además el protocolo largo tuvo esta mejoría posiblemente por la falta de uso de la prostaglandina en el protocolo corto19,39 para eliminar el cuerpo lúteo funcional ya que podría afectar su efectividad4 en época productiva, por último se debe considerar que nuestro tratamiento largo solo estuvo 9 días por lo que no excedió la vida media del cuerpo lúteo (11 a 12 días)17 favoreciendo el recambio folicular lo que podría generar ovocitos en buenas condiciones40,41. Por lo que podemos concluir que el protocolo de sincronización largo tuvo mejor DCU y tasa de gestación respecto al protocolo de sincronización corto, pero no significativo. A pesar de ello, desde el punto de vista económico y de manejo es posible reemplazar el régimen tradicional de P4 de (12-14 días) por un protocolo de sincronización corto (5-7 días).